離子排阻色譜分離測(cè)定的是低電離度的分子而不是離子,分離在離子交換柱上實(shí)現(xiàn)。它的理論基礎(chǔ)是說明離子通過膜擴(kuò)散的Donna平衡,其主要論點(diǎn)是離子交換劑上大體積不擴(kuò)散離子可排斥同電荷小離子擴(kuò)散進(jìn)入該相。
由于陽(yáng)離子和陰離子交換劑排阻離子,使快速通過色譜柱,無保留或保留值很小;而非離子性溶質(zhì)被分布、保留并實(shí)現(xiàn)分離。其保留基于溶質(zhì)分子與交換劑之間范德華力、偶極、疏水作用等。有機(jī)酸同系物保留值隨碳數(shù)增加;具相同碳數(shù)長(zhǎng)鏈脂肪酸保留值隨羧基增加而降低;芳環(huán)衍生物比同碳數(shù)脂肪族化合物保留值要高。
排阻色譜又稱凝膠色譜或凝膠滲透色譜,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同和在填料上滲透程度的不同,以使組分分離。常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,可根據(jù)載體和試樣的性質(zhì),選用水或有機(jī)溶劑為流動(dòng)相。
離子排阻色譜與離子交換色譜在裝置上沒有什么區(qū)別。固定相是通常的磺化S—DVB陽(yáng)離子交換樹脂。樹脂中二乙烯基苯的含量影響弱酸的保留,一般而言,交聯(lián)度越低,就有越多的電解質(zhì)進(jìn)入到樹脂內(nèi)部,使弱酸的保留增強(qiáng)。